Лабораторні роботи

Таблиця 2 

Кількість колі-бактерій у воді в залежності від утворення газу

Кількість пробірокКількість колі-бактерій на 100 мл води

без газуз газом

0

1

2

3

4

55

4

3

2

1

0Понад 16

16

9,2

5,1

2,2

0

Виявлення соїі-бактерій на середовищі Ендо. Напередодні аналізу приготуйте 10 %-й розчин основного фуксину в етиловому спирті. Профільтруйте його перед використанням. У день аналізу в окрему стерильну пробірку налийте 0,5 мл 10 %-го спиртового розчину основного функсину, до якого додайте 10 %-й розчин сірчанокислого натрію (сульфіт) до отримання яскраво-рожевого забарвлення. Розчиніть окремо 0,5 г лактози в 2-3 мл води і прогрійте протягом 5 хв. на киплячій водяній бані. Потім до 100 мл розчиненого м'ясо-пептонного агару з рН = 7,4-7,6 долийте розчин лактози і весь розчин основного фуксину із сульфітом. Середовище розлийте по чашках Петрі, воно повинно бути кремового кольору.

На поверхню середовища, що застигло, нанесіть 0,1 мл - 1 мл води, яку розітріть шпателем Дригальського. Якщо водойма дуже забруднена органічними викидами, то зробіть розведення води і при підрахунку кількості бактерій врахуйте це розведення. Чашки Петрі поставте на 24 год. у термостат при температурі 43 °С. Проведіть забарвлення препаратів за Грамом. Наявність грамнегативних неспороносних паличок у забарвлених колоніях підтверджує їх приналежність до групи соlі-бактерій.

Підрахуйте соїі-індекс, тобто кількість соlі-бактерій, що знаходяться в 1000 мл води, та соlі-титр, тобто кількість мл води, в якій міститься 1 бактерія. Охарактеризуйте рівень забруднення водойми, враховуючи таку градацію:

соlі-титр = 100 - вода чиста,

соlі-титр =10- вода придатна для пиття,

соlі-титр = 0,1- вода непридатна для пиття.

Непридатною для пиття вважається також вода, що містить в 1 мл 100 і більше сапрофітів.

Виявлення Е. соїі методом мембранних фільтрів. Метод підрахунку бактерій на середовищі Ендо дозволяє виявити групу соlі-бактерій. 

Через фільтр діаметром 30 мм пропустіть 300-500 мл чистої води або 1-10 мл розведеної у 100 разів брудної води (що відповідає 0,01-0,1 мл води досліджуваної водойми) так, щоб на фільтрі було не більше 50 колоній Е. соlі. Після фільтрування візьміть фільтр стерильним пінцетом і помістіть його фільтруючою поверхнею догори на агарове середовище Ендо тісно притискаючи його до поверхні.

Через 24 год. інкубації при 37 °С приготуйте із забарвлених колоній препарати і зафарбуйте за Грамом.

Якщо у препаратах відсутні грамнегативні неспороносні палички, це свідчить про відсутність Е. соlі. Якщо такі колонії присутні, проведіть посів у бродильних посудинах або у пробірках із поплавками, в які помістіть 10 мл глюкозо-пептинового середовища.

Помістіть пробірки в термостат при температурі 43°С на 24 год. (ця температура не дозволяє розвиватися звичайним сапрофітам). Про присутність цієї палички судять за інтенсивністю газоутворення.

1 л глюкозо-пептинового середовища містить 10 г пептону, 5 г NaCl, 5,5 г глюкози, рН = 7,4 - 7,5. Проведіть стерилізацію середовища плинною парою.

Питання для самоперевірки

1. У чому суть бактеріального забруднення води.

2. Що відноситься до мікроорганізмів водних екосистем.

 

 ЛАБОРАТОРНА  РОБОТА № 7. ВИЗНАЧЕННЯ ЗАБРУДНЕННЯ ПОВІТРЯ РІЗНИМИ ШКІДЛИВИМИ ГАЗАМИ ЗА ДОПОМОГОЮ ГАЗОАНАЛІЗАТОРА УГ-2

 

Мета роботи:навчитись визначати забруднення повітря різними шкідливими газами.

 

ЗАГАЛЬНI ПОЛОЖЕННЯ

Газоаналізатор УГ-2 (рис. 20) призначений для вимірювання концентрації шкідливих газів (парів) у повітрі. Принцип роботи газоаналізатора УГ-2 оснований на зміні забарвлення шару індикаторного порошку в індикаторній трубці після прокачування через неї повітря збірним пристроєм УГ-2.

Довжина зафарбованого стовпчика індикаторного порошку в трубці пропорційна концентрації газу в повітрі та вимірюється за шкалою, градуйованою мг/м2.

При роботі з газоаналізатором необхідно дотримуватись таких умов експлуатації:

>І навколишнього повітря 10-30 °С;

>пропанон-2 з поглинаючою трубкою -15-30 °С, пропанон-2 без поглинаючої трубки-10-25 °С;

>відносна вологість повітря не більше 90 %;

>атмосферний тиск від 90 до 104 кПа (від 680 до 780 мм рт. ст.);

>масова концентрація пилу не більше 40 мг/м2.

При роботі з газоаналізатором УГ-2 необхідно дотримуватися техніки безпеки (паром).

 Рис.5. Повітрозабірний пристрій УГ-2: - корпус; 2 - сифон; 3 - пружина; 4 - кільце розпірне; 5 - канавка з двома поглибленнями; 6-шток; 7 - втулка; 8 - фіксатор; 9 - плата; 10,12- трубка гумова; 11 - штуцер.

Необхідно бути обережним при роботі зі склом. Не допускати попадання пилу на шкіру та в очі. З індикаторними порошками працюйте в спецодязі. По закінченні вимірювання добре вимийте руки з милом.

 

Хід роботи

Перед початком роботи індикаторні трубки витримайте на повітрі протягом ЗО хв. для прийняття навколишнього середовища. Для визначення концентрації газу відкрийте кришку повітрозабірного пристрою УГ-2 і перевірте відповідність штока номеру повітрозабірного пристрою УГ-2. Відведіть фіксатор, візьміть із гнізда шток і вставте його в направляючу втулку, щоб наконечник фіксатора ходив по канавці штока, над якою вказаний об'єм закачуваного повітря. Натискайте ручкою на головку штока доти, поки кінець фіксатора потрапить у верхнє заглиблення в канавці штока. При цьому кінець гумової трубки