Портал освітньо-інформаційних послуг «Студентська консультація»

  
Телефон +3 8(066) 185-39-18
Телефон +3 8(093) 202-63-01
 (093) 202-63-01
 studscon@gmail.com
 facebook.com/studcons

<script>

  (function(i,s,o,g,r,a,m){i['GoogleAnalyticsObject']=r;i[r]=i[r]||function(){

  (i[r].q=i[r].q||[]).push(arguments)},i[r].l=1*new Date();a=s.createElement(o),

  m=s.getElementsByTagName(o)[0];a.async=1;a.src=g;m.parentNode.insertBefore(a,m)

  })(window,document,'script','//www.google-analytics.com/analytics.js','ga');

 

  ga('create', 'UA-53007750-1', 'auto');

  ga('send', 'pageview');

 

</script>

Функціональні характеристики органної культури надниркових залоз при кріоконсервуванні та ксенотрансплантації

Предмет: 
Тип роботи: 
Автореферат
К-сть сторінок: 
29
Мова: 
Українська
Оцінка: 

флуоресценції за 6 хв у порівнянні з 1, 5 годинами за стандартною методикою, що дозволяє скоротити втрату гормонів на 20% і поліпшити відтворюваність існуючого методу.

3. Уведення стимулятора стероїдогенезу АКТГ у різний термін культивування знижує кріостійкість ендокринного матеріалу, що відбивається у зниженні базальної та стимульованої секреції глюкокортикоїдів. Найбільш стійкою до низькотемпературного збереження є культура, вирощена за відсутності АКТГ. Додавання стимулятора стероїдогенезу на 4-у добу культивування сприяє досягненню максимуму секретуючої активності, характерної для 5-ої доби культивування за відсутності стимулятора.
4. Ксенотрансплантація кріоконсервованої органної культури новонароджених поросят адреналектомованим тваринам незалежно від умов підготовки розмороженого матеріалу до трансплантації сприяє нормалізації гормонального статусу експериментальних тварин. Рівень 11-ОКС у крові досягає 77-85% рівня контрольних тварин у порівнянні з 25% в адреналектомованих тварин до ксенотрансплантації. В усіх випадках до 30-ої – 45-ої доби після підсадження в гістологічних препаратах трансплантатів реєструвалася наявність життєздатних секреторних клітин культури.
5. Компенсаторна функція кріоконсервованої органної культури надниркової залози в організмі адреналектомованих тварин визначається умовами підготовки матеріалу для трансплантації. До 30-ої доби після трансплантації більшу компенсаторну функцію мають культури, трансплантовані після відігрівання. Однак, до 45-ої доби максимальний рівень 11-ОКС у крові адреналектомованих тварин відзначений у випадку підсадження матеріалу, у якому був інгібований хлоридом кадмію стимульований шлях секреції. Проміжний ефект був отриманий при трансплантації рекультивованої кріоконсервованої органної культури, обробленої стимулятором стероїдогенезу перед трансплантацією.
6. Трансплантати, виділені з організму адреналектомованих щурів до 45-ої доби, зберігають секретуючі клітини, у яких рівень 11-ОКС складає 0. 0370. 002 мкг/мг тканини. Функціональна активність трансплантата визначає компенсаторну функцію сім’яників по виробленню глюкокортикоїдів: чим вище функціональна активність трансплантату, тим є нижчою компенсаторна функція сім’яників.
 
ПЕРЕЛІК ОПУБЛІКОВАНИХ РОБІТ
 
Бондаренко Т. П., Геращенко А. В., Кирюшина И. И. Влияние димексида и экстрактов гипофиза на гормональную активность клеток культуры коры надпочечников новорожденных поросят // Проблемы криобиологии. – 1998. – №3. – С. 55-57.
Бондаренко Т. П., Геращенко А. В. Функциональные характеристики органной культуры надпочечников новорожденных поросят после криоконсервирования // Проблемы криобиологии. -2001. -№2. – С. 108-109.
Бондаренко Т. П., Геращенко А. В., Божок Г. А., Алабедалькарим Н. М. Оптимизация условий экстрагирования и развития флуоресценции при определении глюкокортикоидов в биологических жидкостях // Лабораторная диагностика. – 2001. – №3. – С. 36-39.
Заготівля, кріоконсервування та клінічне застосування органної культури наднирників новонароджених поросят в лікуванні недостатності наднирників: Методичні рекомендації / Грищенко В. І., Бондаренко Т. П., Божок Г. А., Легач Є. І., Алабедалькарім Н. М., Геращенко А. В., Самченко І. І. – Харків. -2000. -14с.
Бондаренко Т. П., Божок Г. А., Легач Є. І., Алабедалькарім Н. М., Луговий С. В., Геращенко Г. В. Транслантація кріоконсервованої культури клітин адренокортикальної тканини новонароджених поросят // Трансплантологія. – 2000. – Т. 1, №1. – С. 177-178.
Бондаренко Т. П., Геращенко А. В., Алабедалькарим Н. М., Божок Г. А. Влияние экстрактов гипофиза на содержание белка и 11-ОКС при культивировании органной культуры надпочечников новорожденных поросят // Труды научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения акад. И. Н. Буланкина 16-17 января 2001 г. – Харьков. – 2001. – С. 22-23.
Легач Е. И., Геращенко А. В., Самченко И. И. Ксенотрансплантация криоконсервированной культуры адренокортикоцитов как альтернатива гормонотерапии // Збірник тез конференції молодих вчених ХДМУ: Медицина третього тисячоліття. – Харьков. – 2001. – Ч. 1. – С. 22.
Бондаренко Т. П., Алабедалькарим Н. М., Божок Г. А., Геращенко А. В., Самченко И. И., Легач Е. И. Исследование стероидогенной активности криоконсервированной органной культуры надпочечников при ксенотрансплантации // Проблемы криобиологии. – 2001. -№3. – С. 36.
Bondarenko T. P., Legach E. I., Kiryushina I. I., Gerschenko A. V. Cryopreservation Effect on Adrenocortical Tissue of New Born Piglets // Proc. of 35-th Annual Meeting of the Society for Cryobiology: Pittsburgh., Pensylvania, USA. – 1998. – P. 132.
 
АНОТАЦІЇ
 
Геращенко Г. В. Функціональні характеристики органної культури надниркових залоз при кріоконсервуванні та ксенотрансплантації. – Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03. 00. 19 – кріобіологія, Інститут проблем кріобіології і кріомедицины НАН України, Харків, 2002.
У роботі досліджувались функціональні характеристики органної культури надниркової залози новонароджених поросят при її кріконсервуванні, тривалому зберіганні (-196С) і ксенотрансплантації адреналектомованим щурам в залежності від її вихідних параметрів – введення стимуляторів або інгібіторів секреції на етапах культивування, після відігріву і перед трансплантацією. Кріоконсервований матеріал зберігає незалежно від строків його зберігання (1-360 днів) здатність до стероїдогенезу, базальної та стимульованої секреції і рекультивування.
Кріоконсервований ксенотрансплантат виявляє компенсаторний ефект на гормональний статус тварин (підвищення рівня гормонів у крові), величина якого залежить від його вихідних параметрів. Гістологічні та біохімічні дослідження свідчать про роботу ксенотрансплантату на 30-у – 45-у добу після трансплантації.
Ключові слова: кріоконсервування, органні культури надниркових залоз, ксенотрансплантація, стероїдогенез, секреція глюкокортикоїдів.
 
Геращенко А. В. Функциональные характеристики органной культуры надпочечников при криоконсервировании и ксенотрансплантации. – Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03. 00. 19 – криобиология, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, Харьков, 2002.
В работе исследована взаимосвязь между исходными морфо-функциональными характеристиками органной культуры надпочечников новорожденных поросят и ее чувствительностью к криоконсервированию, длительному хранению (-196С) и функционированием после ксенотрансплантации в организме адреналэктомированных животных. Проведенные исследования позволяют сделать заключение о том, что независимо от сроков хранения при -196С (1-360 дней) криоконсервированная органная культура надпочечников новорожденных поросят после отогрева сохраняет секрецию гормонов на уровне 85% от нативного материала. Как и нативный материал, криоконсервированные органные культуры сохраняют ту же зависимость в ответе на природный и синтетический аналог АКТГ. Клетки культуры после криоконсервирования способны к реагированию на стимуляторы и ингибиторы стероидогенеза и секреции (экстракт гипофиза, хлорид кадмия), что также является свидетельством функциональной полноценности исследуемого материала. Способность к стероидогенезу и секреции криоконсервированная органная культура надпочечников сохраняет и при рекультивировании после отогрева. Максимальный ответ на стимулятор стероидогенеза отмечен на вторые сутки рекультивирования. Гистологический анализ рекультивированных культур свидетельствует о восстановлении морфологических характеристик клеток после криоконсервирования.
Исход замораживания и функционирование трансплантатов в организме реципиентов зависят от функциональной активности культур. Органные культуры, которые не подвергаются обработке экстрактами гипофиза перед ксенотрансплантацией, через 30 суток после трансплантации обеспечивают лучший компенсаторный эффект в организме адреналэктомированных животных, что выражается в максимальном уровне 11-ОКС в крови адреналэктомированных крыс с трансплантацией данной культуры по сравнению с другими видами трансплантаций, а также в лучшей сохранности трансплантата к 30-м суткам эксперимента.
Трансплантация криоконсервированной органной культуры надпочечников новорожденных поросят с разной функциональной активностью ложнооперированным крысам показала, что надпочечники экспериментальных животных при трансплантации им эндокринного материала характеризуются сниженным содержанием 11-ОКС, а по данным гистологичесих исследований в них развиваются процессы, характерные для надпочечниковой недостаточности. Эти процессы выражены в разной степени, что свидетельствует не только о функциональной активности трансплантатов, но и о влиянии их функционального состояния на эти процессы.
Рекультивирование криоконсервированной органной культуры перед трансплантацией приводит к нормализации морфофункциональных характеристик культур, что обеспечивает при ксенотрансплантации к 45 суткам у адреналэктомированных крыс стойкое повышение содержания 11-ОКС в крови, а также снижение компенсаторной функции семенников по выработке глюкокортикоидов. Гистологический и биохимический анализ трансплантатов свидетельствует о наличии в них секретирующих клеток, в которых регистрируется наличие 11-ОКС. При трансплантации рекультивированной органной культуры надпочечников новорожденных поросят максимальное количество жизнеспособных клеток культуры к 45 суткам наблюдается в случае ксенотрансплантации стимулированной экстрактом гипофиза органной культуры.
Максимальный уровень 11-ОКС в плазме крови адреналэктомированных крыс при трансплантации им обработанной хлоридом кадмия рекультивированной криоконсервированной органной культуры надпочечников новорожденных поросят связан, вероятно, с процессами интенсивного отторжения культуры организмом, что выражалось в развитии сильного пододерматита по месту трансплантации. Это подтверждается увеличением содержания 11-ОКС в семенниках крыс.
При исследовании действия экстрактов гипофиза, вводимых в разные сроки культивирования органных культур надпочечников новорожденных поросят, было установлено, что лучшая сохранность функциональных характеристик органной культуры после криоконсервирования отмечается в случае культивирования материала без введения стимулятора стероидогенеза. Таким образом, полученные результаты по функциональным характеристикам криоконсервированных органных культур in vitro и в организме адреналэктомированных животных в виде ксенотрансплантатов дают основание заключить, что криоконсервированная органная культура надпочечников новорожденных поросят может быть рекомендована в клинической практике для коррекции эндокринопатий.
Ключевые слова: криоконсервирование, органные культуры надпочечников, ксенотрансплантация, стероидогенез, секреция глюкокортикоидов.
 
Gerashchenko G. V. Functional characteristics of adrenal gland organ culture during cryopreservation and xenotransplantation. – Manuscript.
Thesis on the obtaining the scientific degree of candidate of biological sciences (PhD equivalent) on the specialty 03. 00. 19 – cryobiology, Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of the Ukraine, Kharkov, 2002
Functional characteristics of adrenal gland organ culture from new born piglets during its cryopreservation, long-term storage (-196С) and xenotransplantation to adrenal-ectomized rats depending on its initial parameters: introduction of the secretion of stimulators or inhibitors at culturing stages, after thawing and before transplantation have been investigated. Cryopreserved material keeps the capability of steroidogenesis, basal and stimulated secretion, as well as re-culturing, not depending on the terms of its storage (1-360 days).
Cryopreserved xenotransplant manifests a compensatory effect on the hormone status of animals (increase of hormone level in blood), the value of which depends on its initial parameters. Histological and biochemical investigations testify to a xenotransplant functioning to the 30th-45th day after transplantation.
Key words: cryopreservation, adrenal organ culture, xenotransplantation, steroidogenesis, secretion of glucocorticoid.
Фото Капча