Вплив блокаторів ліпоксигеназ та екзогенних лейкотриєнів В4 та С4 на апоптоз і некроз гепатоцитів щурів у первинній культурі

Сукупність отриманих нами даних дозволяє встановити закономірний взаємозв'язок між активністю ЕТЛ мітохондрій і шляхом загибелі гепатоцитів.

 

***Р<0, 001 – відносно контролю; ***Р<0, 001- відносно контролю;

###Р<0, 001-відносно культур, оброблених НДГК; #Р<0, 05-відносно культур, оброблених КК;

##Р<0, 01- відносно культур, оброблених НДГК; ##Р<0, 01- відносно культур, оброблених КК;

 

Так, при посиленні некротичних процесів спостерігається пригнічення функціональної активності мітохондрій, тоді як розвиток апоптозу супроводжується підвищенням активності ЕТЛ мітохондрій. Це дає підстави вважати, що одним з механізмів дії ліпоксигеназ та ліпоксигеназних похідних АК на життєздатність гепатоцитів є зміни функціональної активності мітохондрій.

 

 

1. Первинна культура гепатоцитів щурів є адекватною експериментальною моделлю для дослідження безпосередньої дії блокаторів ліпоксигеназ та екзогенних лейкотриєнів на життєздатність клітин та співвідношення процесів апоптозу і некрозу гепатоцитів, що є недостатньо вивченим.

2. У присутності в культуральному середовищі загального блокатора ліпоксигеназ – нордигідрогуаяретової кислоти в концентрації 2*10-5 моль/л – зменшувався вихід аланінамінотрансферази з гепатоцитів і підвищувалась кількість апоптичних клітин (за даними подвійного забарвлення та електронної мікроскопії) у всі строки дослідження, що свідчить про антинекротичну і апоптоз-індукуючу його дію. Ефект блокатора 5-ліпоксигенази – кофейної кислоти в концентрації 2*10-5 моль/л – був однонаправленим з ефектом нордигідрогуаяретової кислоти, але проявлявся у меншій мірі. Це свідчить про те, що в регуляції апоптозу і некрозу в гепатоцитах задіяна як 5-ліпоксигеназа, так і інші ліпоксигенази.

3. Додавання нордигідрогуаяретової кислоти і, в меншій мірі, кофейної кислоти у культури гепатоцитів викликало підвищення активності електрон-транспортного ланцюга мітохондрій. Це дає підстави пов'язати антинекротичну та проапоптичну дію блокаторів ліпоксигеназ з посиленням функціональної активності мітохондрій гепатоцитів.

4. Додавання екзогенних лейкотриєнів В4 або С4 в ранній строк досліджень в діапазоні концентрацій від 10-7 до 10-12 моль/л викликало збільшення виходу аланінамінотрансферази у культуральне середовище, що свідчить про посилення некротичних процесів в клітинах. За даними подвійного забарвлення і електронної мікроскопії, у присутності лейкотриєнів В4 або С4 в концентрації 10-8 моль/л збільшувалась кількість некротичних і зменшувалась кількість живих клітин. Ефект лейкотриєнів за умов дії блокаторів ліпоксигеназ був подібним, однак дещо більш вираженим.

5. За даними подвійного забарвлення клітин додавання лейкотриєнів В4 і С4 в концентраціїи 10-8 моль/л істотно пригнічувало апоптоз, індукований блокаторами ліпоксигеназ у культурі гепатоцитів.

6. Додавання лейкотриєнів В4 і С4 в концентраціях 10-7 і 10-8моль/л, окремо та на фоні блокаторів ліпоксигеназ, призводило до зниження активності електрон-транспортного ланцюга мітохондрій, що дає підстави пов'язати пронекротичну та антиапоптичну дію лейкотриєнів з пригніченням функціональної активності мітохондрій гепатоцитів.

7. Аналіз і узагальнення отриманих результатів дозволяють зробити висновок, що ліпоксигеназний шлях метаболізму арахідонової кислоти є важливим регулятором життєздатності і загибелі гепатоцитів. Ліпоксигеназні похідні арахідонової кислоти, зокрема лейкотриєни В4 і С4, зміщують співвідношення між апоптичною та некротичною загибеллю клітин в бік останньої. Такий механізм реалізується через зміни функціональної активності мітохондрій.

 

 

Статті:

1. Makogon N., Lushnikova I., Korneitchuk A., Alexeyeva I. Effects of nordihydroguaiaretic acid and indomethacin on the viability and functional activities of normal and carbon tetrachloride-injured rat hepatocytes cultured alone and with Kupffer cells // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. – 1998. -23, N 2. – P. 33-38.

2. Makogon N. V., Korneitchuk A. N., Lushnikova I. V., Alexeyeva I. N. Effects of exogenous leukotrienes B4 and C4 on the viability of cultured rat hepatocytes // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. -2000. -25. – P. 87-91.

3. Алексєєва І. М., Корнійчук Г. М., Лушнікова І. В., Макогон Н. В. Експериментальне дослідження патологічної дії похідних арахідонової кислоти за ліпоксигеназним шляхом її метаболізму на гепатоцити щурів в культурі // Збірник наукових праць співробітників КНАПО ім. Шупика Київ. -2000. -Випуск 9, книга 4. -Стр. 11-15.

4. Корнійчук Г. М., Макогон Н. В., Лушнікова І. В., Алексєєва І. М. Блокатори ліпоксигеназ індукують апоптоз гепатоцитів щурів у первинній культурі // Укр. біохім. журн. – 2002. -№1. -С. 125-127.

5. Корнійчук Г. М., Макогон Н. В., Лушнікова І. В., Алексєєва І. М. Вплив блокаторів ліпоксигеназ та екзогенних лейкотриєнів В4 і С4 на апоптоз та некроз гепатоцитів щурів у первинній культурі // Фізіол. журнал. -2002. -т. 48, №3. -С. 34-40.

Тези:

6. Алексєєва І. Н., Макогон Н. В., Лушнікова І. В., Корнейчук А. М. Роль ейкозаноїдів в аутокринній та паракринній регуляції функцій клітин печінки в культурі // Тези докл. на ХV з'їзді Укр. фізіол. тов. (Донецьк, 12-15 травня 1998 р.), Фізіол. журн. – 1998. – Т. 44, № 3. – С. 181.

7. Алексєєва І. Н., Бризгіна Т. М., Алексюк Л. І., Павлович С. І., Макогон Н. В., Мартинова Т. В., Портниченко А. Г., Лушнікова І. В., Корнійчук А. М., Сухіна В. С. Роль ейкозаноїдів в аутокринній і паракринній