Аналіз ЛРС

Зріз уміщують в 1 краплю води, розправляють і відсмоктують воду фільтрувальним папером. На зріз наносять 1 краплю розчину хлор-цинк-йоду, накривають покривним склом і розглядають під мікроскопом. Клітковина набуває синьо-фіолетового або лілового кольору (деревина забарвлюється в жовтий колір).

Гістохімічний аналіз

Гістохімічні реакції використовують для встановлення ідентичності лікарської рослинної сировини. За допомогою цих реакцій можна виявити ті чи інші сполуки безпосередньо в клітинах і тканинах, де вони локалізуються. Гістохімічні реакції проводять на свіжих або фіксованих зрізах матеріалу; у деяких випадках можна використовувати висушений матеріал. Результати реакції розглядають під мікроскопом. Більшість гістохімічних реакцій потрібно проводити швидко, щоб не відбулась дифузія досліджуваної речовини і не зруйнувались тканини під впливом реактиву. За допомогою гістохімічного аналізу також можна перевірити доброякісність сировини (наприклад, сильне здерев'яніння луб'яних волокон кореня алтеї свідчить про недоброякісність даної сировини).

Фітохімічний аналіз

Фітохімічний аналіз ЛРС полягає в проведенні якісного і кількісного визначення діючих, супутніх, екстрактивних речовин, а також вологи і золи. Деякі якісні реакції на окремі речовини (слиз, крохмаль, жирні й ефірні олії та ін.) викладено у главі «Мікрохімічний та гістохімічний аналіз».

Полісахариди. Якісні реакції. Під час змочування зрізу або порошку кореня алтеї розчином амонію гідроксиду або натрію гідроксиду з’являється жовте забарвлення.

Кумарини. Якісні реакції. Для проведення якісних реакцій і хроматографічних досліджень готують витяжку: 3 г подрібненої сировини вкладають у колбу ємністю 100 мл зі шліфом, додають ЗО мл 95% спирту, закривають повітряним холодильником і кип’ятять на водяній бані 20 хв. Потім витяжку охолоджують і фільтрують.

Лактонна проба. До 3-5 мл фільтрату додають 5 крапель

10 % спиртового розчину калію гідроксиду і нагрівають на водяній бані 5 хв (за наявності кумаринів розчин жовтіє). Потім доливають 5-10 мл очищеної води, перемішують (може з’явитися каламуть або осад за рахунок ліпофільних сполук), а потім додають 10% розчин хлоридної кислоти до кислої реакції розчину. Виникнення каламуті або осаду свідчить про можливу наявність кумаринів у сировині.

Хромони. Якісні реакції. З концентрованими мінеральними кислотами хромони утворюють солі характерного лимонного кольору, з концентрованими основами – пурпурово-червоне забарвлення. Для проведення якісних реакцій сировину, що містить хромони, екстрагують органічними розчинниками, витяжки упарюють і хроматографують на колонках силікагелю, підбираючи фракції, що містять хромони. Ці фракції упарюють і перекристалізовують із різних розчинників.

Фенологлікозиди. Якісні реакції

1. Фенологлікозиди з вільною гідроксильною групою дають усі реакції, характерні для фенолів (реакції азотосполучення, реакції із залізоамонійними галунами та ін.). Ці реакції використовують для виявлення фенолів на хроматограмах.

2. Готують 5% відвар з подрібненої сировини, охолоджують і фільтрують. До 1 мл фільтрату додають невеликий кристалик сульфату закисного заліза; спочатку з’являється червонувато – фіолетове забарвлення, яке змінюється на темно-фіолетове, а потім випадає темно-фіолетовий осад (реакція на вміст арбутину).

3. До 1 мл фільтрату (у фарфоровій чашці) додають 4 мл розчину аміаку і по краплі 1 мл 10% розчину натрію фосфорно – молібденовокислого у хлоридній кислоті. За наявності арбутина з’являється синє забарвлення.

Флавоноїди. Якісні реакції. Для проведення якісних реакцій сировину, що містить флавоноїди, екстрагують органічними розчинниками, екстракт фільтрують і очищають.

Ціанідинова реакція. До 1 мл очищеного екстракту додають 2-3 краплі концентрованої хлоридної кислоти і незначну кількість порошку металічного магнію. З’являється забарвлення різного кольору (від жовтого до яскраво-червоного). Забарвлення залежить від будови сполук.

2. До 1 мл очищеного екстракту додають 1-2 краплі 10% водно – спиртового розчину калію або натрію гідроксиду. З’являється жовте забарвлення.

3. До 1 мл очищеного екстракту додають 1-2 краплі 10% розчину заліза (ІІІ) хлориду. З’являється коричневе забарвлення.

4. До 1 мл очищеного екстракту додають 3-5 крапель 10% розчину основного ацетату свинцю. Утворюється осад.

Лігнани. Якісні реакції. Для лігнанів характерні ті самі реакції, що й для інших фенольних сполук.

Антраценопохідні. Якісні реакції

1. При змочуванні внутрішньої поверхні кори крушини 1 -2 краплями 10% розчину натрію гідроксиду спостерігають криваво-червоне забарвлення.

2. Антраценопохідні з сировини екстрагують спиртовим розчином калію гідроксиду під час кипіння. Після охолодження фільтрат підкислюють хлоридною кислотою до змінення червоно-бурого кольору розчину на жовто-бурий і екстрагують водний розчин діетиловим ефіром. Ефірний розчин збовтують із розчином аміаку, внаслідок чого ефірний шар залишається забарвленим у жовтий колір, а лужний набуває червоного або фіолетового кольору.

3. У суху пробірку вміщують невелику кількість сировини у вигляді грубого порошку. Дно пробірки нагрівають, тримаючи її горизонтально. Антраценопохідні, що містяться в сировині, під час мікропереганяння утворюють жовті пари, які конденсуються на холодних стінках пробірки у вигляді жовтих кристалів. У разі додавання 10% спиртового розчину натрію гідроксиду вони набувають вишнево-червоного забарвлення.

Дубильні речовини. Якісні реакції

Витяжка: 0, 1 г сировини подрібнюють і просіюють через сито з діаметром отвору 1 мм; вміщують у колбу ємністю 250 мл., додають 100 мл. води і нагрівають на водяній бані 20 хв., потім охолоджують і фільтрують. Для того щоб очистити фільтрат, витяжку збовтують у ділильній лійці з хлороформом (1: 1). Хлороформний шар витяжки відокремлюють, а до водної витяжки додають три об’єми етанолу. Утворений осад відфільтровують і відокремлюють (полісахариди).

1. До 2 мл очищеного