Імуно-біохімічні аспекти ефективного використання ультрафіолету в клінічній практиці (експериментально-клінічне дослідження)

Ціль роботи: дати імуно-біохімічне обґрунтування раціонального використання ультрафіолетового випромінювання в умовах санаторно-курортного лікування з урахуванням типів фотогеного імунного реагування на УФ-радіацію.

Задачі роботи:

Вивчити закономірності УФ-індукованих пероксідаційних процесів у взаємозв'язку з морфо-функціональними властивостями клітин крові при УФО.

Вивчити фотомодифікаційні ефекти та УФ-фотопротекторну дію низькодозового превентивного УФО.

Вивчити процеси старіння еритроцитів у зв'язку з УФ-фотогенною пероксідацією і ефектами антиоксидантів, популяційну динаміку і імунозалежну елімінацію еритроцитів людини, та вплив на ці процеси УФ-радіації.

Вивчити вплив ультрафіолету на рівень експресії маркерів клітинної диференцировки й антигенів головного комплексу гістосумісності імуно-компетентних клітин.

Вивчити стан шкірного імунітету (SALT-системи) при УФО та його взаємозв'язок з УФ-індукованими пероксідаційними процесами, закономірності розвитку локальних і системних імуносупресивних ефектів при УФ-опроміненні шкіри.

Вивчити можливості керування імуносупресивними реакціями, а також – цілеспрямованого фотогенезу імунологічної толерантності.

Вивчити взаємозв'язок варіантів імунотропних ефектів ультрафіолетової радіації і типів конституції дітей, що проходять санаторно-курортне лікування з застосуванням геліотерапії.

Вивчити патогенетичні взаємозв'язки та механізми формування імунологічної картини різних типів УФ-фотогенного імунного реагування.

Вивчити особливості прояву типів УФ-фотогенного імунного реагування у дітей із зони радіонуклідного забруднення (аварії на ЧАЕС).

Вивчити дозові закономірності імуно-біохімічного реагування при проведенні геліотерапії.

Об'єктом дослідження з'явилися імунотропні ефекти УФ-радіації в зв'язку з фотогенною пероксідацією, фототропною динамікою клітинних популяцій, фотоіндукованою зміною кілерного потенціалу клітин-ефекторів, апоптотичною готовністю клітин, а також – взаємозв'язок з генетичними (конституціональними) типами УФ-індукованих імунних реакцій і закономірностями розвитку УФ-фотогенної імуносупресії.

Предмет дослідження експериментальної частини роботи був визначений біоетичними розуміннями. Потребуючий великого обсягу крові аналіз морфо-функціонального стану її клітин, пероксідаційного статусу, експресії маркерів CD і HLA був проведений на крові і її компонентах 278 практично здорових волонтерів (студенти КДМУ обох статей у віці 18-32 років). Дослідження супресії потенційно небезпечних реакцій гіперчутливості, викликаної хімічним гаптеном, і контактних алергійних реакцій – на 94 білих лабораторних щурах лінії “Вістар”. Предметом клінічного дослідження стало 434 дитини (які проходили санаторно-курортне лікування на курорті Євпаторія), з них – 93 хворих ревматизмом у неактивній фазі (клас IX, Н109 і Н105 МКБ), 102 хворих хронічним тонзилітом (клас X, J35. 0), з регіону ЧАЕС – 82, 93 – хворих диспластичним сколіозом I-II ступеня (клас XIII, М41. 1) і 64 здорових дитини у віці від 11 до 15 років.

Методи дослідження. Фотомодифікаційну та антиоксидантну дію превентивного УФО вивчали по ефектах імунозалежної фрагментації еритроцитів та динаміці еритроцитометричних показників. Закономірності дії фотомодифікуючих біохімічних агентів при УФО було вивчено по впливу вітамінів С и Е на пероксидаційний статус, морфо-функціональні параметри клітинних мембран, процеси УФ-індукованого фотостаріння та руйнування клітин крові. Морфологічні зміни клітин крові оцінювали за допомогою світлової та електронної мікроскопії. Локальні імуносупресивні ефекти УФО та антигенспецифічну імуносупресію вивчали в експериментальних умовах по реакції контактної (КГЧ) і уповільненої (УГЧ) гіперчутливості у лабораторних щурів на гаптен динітрохлорбензол (ДНХБ) і чужорідні протеїни – бичачий і людський альбуміни. Вивчалися показники загальноклінічного аналізу крові, динаміка протеїнограм, рівня Na+ і K+ плазми і еритроцитів, імунологічні критерії (рівні IgА, М, G; В-лімфоцитів, Т-хелперів і супрессорів), показники неспецифічної резистентності (лізоцим, комплемент; титри АСГ, АСЛ-О). Експресія маркерів CD і антигенів HLA оцінювалася методом непрямої імунофлюоресценції. Гормональний стан визначали радіоімунним методом по динаміці екскреції трийодтіроніна – Т3, тіроксину – Т4 і кортизолу.

Усі дані піддані статистичній обробці для зв'язаних і не зв'язаних спостережень. Вірогідність розходження параметрів оцінювалося за критерієм t. Взаємозв'язок досліджуваних явищ – за коефіцієнтами лінійної і нелінійної кореляції. Для інтегрального аналізу критеріїв імунологічних реакцій застосовували багатофакторний аналіз (Н. А. Плохінський, 1970, Є. Ф. Лакін, 1990). Полімодальність варіаційних розподілів оцінювали за допомогою “нульової гіпотези” по відповідності емпіричного й ідеального розподілів, далі мірою розходжень служив параметр асиметрії і глибини трансгресії рядів. Варіаційну неоднорідність сукупностей оцінювали по показнику ексцесу.

Наукова новизна роботи. У роботі вперше описані закономірності прямого та опосередкованого генезу локальної та системної імуносупресії при впливі УФР в експериментальних умовах, а також – неспецифічні й антигензалежноі форми УФ-фотогенної транзиторної толерантності. Вперше показана наявність двох різних типів імунного реагування при впливі УФР в умовах санаторно-курортного лікування, популяційно добре співпадаючих із ТК, а патогенетично – сполучених з реакціями клітинного, або – гуморального ланок імунітету. Висловлено припущення про можливу роль інтраепітеліальних -лімфоцитів у забезпеченні типажу фотогенної імунологічної реакції. Деталізовано відомі з літератури факти захисної дії превентивного (попереднього) малодозового УФО у відношенні до наступних сеансів впливу УФ-радіації.

Практична значимість отриманих результатів. Методика визначення типів конституції в дітей (по В. П. Казначеєву) і типів імунного реагування в умовах Євпаторійского курорту впроваджена в клінічних санаторіях «Примор'є», «Дружба», «Здравниця». Запропоновано формулу визначення критерію ТК по базових антропометричних параметрах, простий лабораторний критерій динаміки чисельності еритроцитів, еозинофільно-моноцитарного індексу в ході геліотерапії для оцінки приналежності дітей до УФ-фотогенних типів імунного реагування. Патогенетично обґрунтована і показана необхідність обмеження доз